A method for determining the presence of mycobacteria species in an organism or biological sample, the method comprising adding to the organism or biological sample a probe molecule comprising a substrate and a label, which probe molecule can be incorporated into mycobacteria, the presence of mycobacteria being determined by a detector responsive to the presence of the label, optionally after applying a stimulus suitable probe molecules include compounds comprising a label and a substrate, which label is can be detected by a detector responsive to the presence of the label, optionally after applying a stimulus, characterised by compound being able to engage with the active site of Antigen 85B (Ag85B) such that it can form simultaneous hydrogen bonds with two or more amino acids in the active site selected from Arg 43, Trp 264, Ser126, His 262 and Leu 42, or the corresponding amino acids in Antigen 85A (Ag85A) or Antigen 85C (Ag85C), at least one of which is with Ser126.Linvention concerne un procédé pour déterminer la présence despèces de mycobactéries dans un organisme ou un échantillon biologique, le procédé consistant à ajouter à lorganisme ou à léchantillon biologique une molécule sonde qui comprend un substrat et un marqueur, la molécule sonde pouvant être incorporée dans les mycobactéries, la présence des mycobactéries étant déterminée par un détecteur réagissant à la présence du marqueur, éventuellement après application dun stimulus des molécules sondes appropriées comprenant des composés qui contiennent un marqueur et un substrat, le marqueur pouvant être détecté par un détecteur réagissant à la présence du marqueur, éventuellement après application dun stimulus, le composé étant caractérisé en ce quil peut être mis en contact avec le site actif de lantigène 85B (Ag85B) de façon à pouvoir former simultanément des liaisons hydrogène avec au moins deux acides aminés dans le site actif sélectionné parmi Arg 43, Trp 264, Ser126, His 262 et Leu 42, ou les acides