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一种应用于马铃薯上的CRISPR/Cas9载体的构建方法
- 专利权人:
- 山西省农业科学院作物科学研究所
- 发明人:
- 闫建俊,白云凤,左静静,左敏,李萌
- 申请号：
- CN201910913593.3
- 公开号：
- CN110607322A
- 申请日:
- 2019.25.09
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2019
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明公开了一种应用于马铃薯上的CRISPR/Cas9载体的构建方法,属于植物分子生物学领域。该方法包括如下步骤:根据马铃薯中糖苷生物碱合成关键酶基因PGA2设计用于基因敲除的gRNA靶点,合成引物gRNA,然后将gRNA和Cas9蛋白结合形成表达盒,再将表达盒插入到表达载体PCAMBIA 1300中,将得到的连接物转化到大肠杆菌中,摇菌测序后,构建用于遗传转化的农杆菌工程菌,转化马铃薯,提取基因组DNA,筛选出阳性植株。本发明首次在马铃薯作物中通过CRISPR/Cas9基因编辑技术对马铃薯中糖苷生物碱合成关键酶基因进行编辑,为后续基因功能研究或马铃薯基因工程育种等奠定技术基础。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
