本发明涉及一种重组蛋白及其表达方法、纯化方法及用途。重组蛋白为RSV的F蛋白,即RSV‑F,所述RSV‑F的核苷酸序列为序列表SEQ ID No.1,所述RSV‑F蛋白的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2。所述重组蛋白的表达方法包括:1)RSV‑F编码片段的扩增;2)根据扩增后的RSV‑F编码片段构建包含F蛋白的亚克隆质粒;3)根据所述亚克隆质粒构建RSV‑F的真核表达质粒;4)转染所述RSV‑F的真核表达质粒于HEK293E细胞中,在培养基中培养。所述重组蛋白的纯化经阴离子交换柱纯化、阳离子交换柱纯化以及凝胶过滤色谱柱纯化。纯化后的RSV‑F重组蛋白,具有免疫原性,可用于RSV亚单位疫苗的研发或者RSV感染的免疫诊断。