The present disclosure provides compositions and methods for editing a target site of a plant genome by delivery of functional editing components using a modified tobacco mosaic virus (mtmv).The method disclosed herein can be used to deliver a gene editing system, such as DNA endonuclease, to tobacco plant cells for altering the target site of the plant genome.Further, the methods and compositions disclosed herein provide an in vitro generation of RNA molecules encoding a megacronuclease before delivery of RNA to plant cells.After introduction of a nucleic acid molecule encoding a functional editing component and subsequent functional editing of the functional editing component, the plant can be cultivated to produce the edited seed of the genomic target site.Subsequently, the embryo is rescued and cultured to produce modified plants that do not contain heterologous genes.本開示は、改変タバコモザイクウイルス（ｍＴＭＶ）を使用した機能的編集成分の送達により、植物ゲノムの標的部位を編集するための組成物及び方法を提供する。本明細書に開示の方法を使用して、植物ゲノムの標的部位の改変のために、ＤＮＡエンドヌクレアーゼなどの遺伝子編集系をタバコ植物細胞に送達することができる。さらに、本明細書に開示の方法及び組成物は、植物細胞へのＲＮＡの送達の前に、メガヌクレアーゼをコードするＲＮＡ分子のインビトロ生成を提供する。機能的編集成分をコードする核酸分子の導入及びその後の該機能的編集成分の発現後、植物を栽培し、ゲノム標的部位が編集された種子を作製することができる。次いで、種子の胚救出を行い、培養して、異種遺伝物質を含まない改変植物が作製され得る。
