本发明涉及一种缺失型人角质细胞生长因子‑1的重组制备方法,其包括用于获取缺失型人角质细胞生长因子‑1的重组表达方法、用于形成重组缺失型人角质细胞生长因子‑1的102位和106位间的一对二硫键的二硫键形成方法,其中,缺失型人角质细胞生长因子‑1的氨基酸序列特征为SEQ ID NO:1。本发明的重组表达方法,通过采用含T7启动子或BAD启动子的表达载体与表达宿主组成表达体系,直接表达得到的缺失型人角质细胞生长因子‑1,其N端无甲硫氨酸,无需工具酶酶切;本发明的二硫键形成方法,通过采用半胱氨酸作为添加剂,重组缺失型人角质细胞生长因子‑1的102位和106位间正确形成一对二硫键配对形成效率大于95%,具有与天然型KGF‑1相同的生物效价和生物作用。