本发明提供一种用于金黄色葡萄球菌耐药性检测的组合物，包括用于PCR扩增的引物-探针，所述引物-探针包括：SEQ ID NO.1/2及SEQ ID NO.3；以及，下述引物-探针组中的至少一组：SEQ ID NO.4/5/6；SEQ ID NO.7/8/9；SEQ ID NO.10/1/12；SEQ ID NO.13/14/15；SEQ ID NO.16/17/18。采用上述组合物及检测方法，可在对金黄色葡萄球菌进行菌属鉴定的同时，可对其耐药性基因进行有效的检测分析，可以在一次检测过程中同时完成金黄色葡萄球菌、MRSA、耐红霉素金黄色葡萄球菌及耐氨基糖苷类抗生素的金黄色葡萄球菌的检测及耐药性分析，具有快速高通量等优点，满足了食品中微生物检测迅速准确的需求。
