In the medical field, there is a demand for an RTU (Ready-to-use) formulation in the form of a solution, which is highly convenient than a freeze-dried formulation, because it does not require a complicated dissolution step and can be immediately diluted and then administered. An object of the present invention is to provide an injectable solution preparation containing pemetrexed in which the production of related substances is suppressed and solution coloring is suppressed during the storage period. According to the present invention, there is provided a method for producing an injectable solution formulation containing pemetrexed disodium as an active ingredient, comprising: (1) preparing an injectable solution using a pemetrexed disodium-containing raw material； and (2) the above. Filling the solution for injection into a formulation container and sealing with a rubber stopper in an atmosphere where the oxygen concentration in the void is 1% by volume or less, wherein the raw material has a retention time (RT) of pemetrexed in HPLC analysis. A manufacturing method is provided, which contains 0.10% or less of a component having a relative retention time (RRT) of 0.41±0.03 as an index.医療現場において、凍結乾燥製剤より、煩雑な溶解工程が不要で希釈してすぐ投与できる等で利便性が高い溶液形態のＲＴＵ（Ｒｅａｄｙ－ｔｏ－ｕｓｅ）製剤が求められている。本発明の課題は、保存期間中で、類縁物質の生成を抑制すると共に溶液着色が抑制されたペメトレキセドを含む注射用溶液製剤を提供することにある。本発明によれば、ペメトレキセド２ナトリウムを有効成分として含有する注射用溶液製剤の製造方法であって、（１）ペメトレキセド２ナトリウム含有原料を用いて注射用溶液を調製する工程、および（２）前記注射用溶液を製剤用容器に充填して、空隙部分の酸素濃度が１体積％以下の雰囲気でゴム栓により密栓する工程、を含み、前記原料が、ＨＰＬＣ分析におけるペメトレキセドの保持時間（ＲＴ）を指標とした相対保持時間（ＲＲＴ）が０．４１±０．０３の成分を０．１０％以下で含有する、製造方法が提供される。
