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一种根癌农杆菌介导的大麦茎尖转化方法
- 专利权人:
- 华中农业大学
- 发明人:
- 廖玉才,李和平,刘正位,高春生,黎冬华
- 申请号:
- CN201110257189.9
- 公开号:
- CN102304544B
- 申请日:
- 2011.09.01
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 王敏锋
- 摘要:
- 本发明公开了一种根癌农杆菌介导的大麦茎尖转化方法,其步骤:A.大麦茎尖培养及载体构建:1)选取大麦颖果,去除稃片,剥取成熟胚,盾片向下放置在萌发培养基上萌发;2)从中间载体pMBL-3及和绿色荧光蛋白基因GFP用酶切和PCR方法获得玉米泛素启动子及相关序列;B、利用农杆菌介导大麦茎尖遗传转化,步骤:1)大麦茎尖的获取;2)茎尖的浸染;3)茎尖和农杆菌GV3101共培养培养基:取出经农杆菌浸染的茎尖,在无菌滤纸上吸干表层菌液;4)茎尖的恢复培养基;5)茎尖的筛选培养基;6)再生植株的春化和栽培,得到候选的转化植株。方法易行,操作简便,周期短、效率高,程序简单,操作方便,结果可靠。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/