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一种高效增殖、靶向杀伤肿瘤的CTL制备方法
专利权人:
成都百赛泰科生物科技有限公司
发明人:
魏薇,赵西娟,魏丽婉,孟祥玲
申请号:
CN201410192581.3
公开号:
CN103923880B
申请日:
2014.05.08
申请国别(地区):
中国
年份:
2016
代理人:
谭新民
摘要:
本发明公开了一种高效增殖、靶向杀伤肿瘤的CTL制备方法。所述CTL制备方法,包括以下步骤:(a)免疫磁珠阴性分选去除CD4+CD25+Treg细胞;(b)将混合细胞置于装有无血清培养基中培养,获得悬浮细胞和贴壁细胞,(c)贴壁细胞中加入GM-CSF及IL-4,培养5天;第6天,加入肿瘤细胞全抗原,第7天加入TNF-α和IL-27;(d)将悬浮细胞移至经抗CD3单抗和重组人纤维连接蛋白包被的培养瓶中,加入IFN-γ,第2天加入IL-2、IL-12、IL-27,培养至第8天,得到CIK细胞;(e)将CIK细胞与成熟DC细胞混合,加入IL-12、IL-7、抗CD28单克隆抗体培养;第3天,加入抗CTLA-4单克隆抗体,再培养4天。本发明所述方法提高体外CTL细胞增殖的效率及其靶向杀伤肿瘤细胞的活性,抑制外周血单个核细胞向CD4+CD25+Treg细胞转化。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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