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构建灵长类动物miRNA-122敲除模型的方法、灵长类动物肝癌模型及用途
- 专利权人:
- 北京大学
- 发明人:
- 席建忠,孙常宏
- 申请号：
- CN201410593647.X
- 公开号：
- CN105624195A
- 申请日:
- 2014.10.30
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 摘要：
- 构建灵长类动物肝癌模型的方法，包括以下步骤：a)将特异性靶向miR122的gRNA序列插入到适宜的载体中，构建出体外转录miR122的模板载体；b)将cas9基因的序列插入到适宜的载体中，构建出体外转录cas9基因的模板载体；c)以步骤a)中的载体为模板进行PCR扩增，得到体外转录miR122的gRNA的模板；d)用限制性内切酶将步骤b)中的模板载体线性化，得到体外转录cas9基因的模板；e)以步骤c)和d)中的产物为模板进行体外转录，得到特异性靶向miR122的gRNA和cas9基因的mRNA；f)将步骤e)中的gRNA和mRNA注射到所述动物的受精卵细胞中，或者注射到卵母细胞中，再与所述动物的精子进行体外受精得到受精卵细胞；g)将步骤f)中的受精卵细胞移植入所述动物的子宫中，由此产生稳定的敲除miR122的动物子代。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
