一种蛋白质双向电泳方法
- 专利权人:
- 广东省农业科学院作物研究所
- 发明人:
- 张二华,梁炫强,陈小平
- 申请号：
- CN200910193330.6
- 公开号：
- CN101696230B
- 申请日:
- 2009.10.27
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 裘晖
- 摘要：
- 本发明提供了一种蛋白质双向电泳方法。该方法首先用盐酸胍溶液溶解新鲜制备或冻存的蛋白干粉，再加入终浓度分别为2-5mM的三丁基膦和50-100mM的2-乙烯基吡啶以还原并烷基化蛋白；避光静置反应60-120分钟后加入5-10倍体积-20℃预冷的无水乙醇沉淀蛋白；再用乙醇洗除盐分，晾干或冻干后即得烷基化蛋白。烷基化蛋白用于双向电泳分析时，等电聚焦上样缓冲液中可不加还原剂，胶条的平衡也可简化为一步，同时平衡液中也无需再添加还原剂和/或烷基化试剂。本发明可提高蛋白质的溶解性，以及在电泳过程中的稳定性，简化双向电泳的操作步骤进而减少蛋白的损失。能广泛用于蛋白质组学领域。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
