本发明公开了抗猪瘟病毒感染的siRNA及其应用,属于抗猪瘟病毒siRNA的鉴定及其应用领域。本发明首先公开了分别靶向猪瘟病毒基因组Npro、P7、NS5A和NS5B基因的抗猪瘟病毒感染的siRNA,其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1-12所示。本发明进一步利用构建的重组猪瘟病毒筛选出对猪瘟病毒干扰或抑制活性最强的siRNA,其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.12所示。本发明还公开了含有所述抗猪瘟病毒感染的siRNA的表达载体及其应用。本发明抗猪瘟病毒感染的siRNA对猪瘟病毒抑制活性强,具有制备成预防或治疗猪瘟的药物或试剂的潜力。