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一种高效快速的均一化全长cDNA文库构建方法
- 专利权人:
- 武汉爱基百客生物科技有限公司
- 发明人:
- 李泽卿
- 申请号：
- CN201810035960.X
- 公开号：
- CN108193284A
- 申请日:
- 2018.01.15
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 冯子玲
- 摘要：
- 本发明公开了一种高效快速的均一化全长cDNA文库构建方法，包括如下步骤：将mDNA在PCR引物以及寡核苷酸引物的引导下，通过逆转录酶逆转录，能够合成第一链cDNA，将纯化时的第一链cDNA需要结束时，将第一链cDNA放到冰上终止反应，然后将第一链cDNA置于试管内，然后放置在预热的PCR仪上，将第一链cDNA再次利用PCR引物以及锚定引物，利用改进后的Cap‑trapper法在PCR仪合成并扩增第二链cDNA，并在14‑20摄氏度的条件下进行过夜，分别对第二链cDNA做λ噬菌体包装反应，未扩增的第二链cDNA文库在1‑4摄氏度的条件下保存12‑18天。该方法在构建细菌cDNA文库时能够利用特性进行反转录提供理论基础，重组率高，符合现在生物发展的需求。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
