GEORGIA STATE UNIVERSITY RESEARCH FOUNDATION; INC.
发明人:
WANG, BINGHE,LI, MINYONG,HUANG, ZHEN,LIN, NA
申请号：
EP08781954
公开号：
EP2176277A4
申请日:
2008.07.17
申请国别(地区):
EP
年份:
2013
代理人:
摘要：
The present disclosure encompasses oligonucleotide aptamers selectively binding a target glycosylated polypeptide or protein, and having biased affinity for the glycan through a boronic acid linked to a nucleosidic base of a nucleotide(s). The disclosure further encompasses methods for isolating an aptamer(s) selectively binding a target glycosylated polypeptide, where, from a population of randomized oligonucleotides that have at least one nucleotide having a boronic acid label linked to a base, is selected a first subpopulation of aptamers binding to the target glycosylated polypeptide or protein. This subpopulation is then amplified without using boronic acid-modified TTP, and amplification products not binding to a target glycosylated polypeptide or protein are selected. The second subpopulation of aptamers is then amplified using boronic acid-modified TTP to provide a population of boronic acid-modified aptamers capable of selectively binding to a glycosylation site of a target polypeptide or protein. Other aspects of the disclosure encompass methods for the use of the modified aptamers to detect glycosylated species of a polypeptide or protein.La présente invention concerne des aptamères doligonucléotide se liant sélectivement à un polypeptide ou une protéine glycosylée cible, et ayant une affinité sollicitée pour le glycan par lintermédiaire dun acide boronique lié à la base nucléosidique dun (de) nucléotide(s). Linvention concerne en outre des procédés pour isoler un (des) aptamère(s) se liant sélectivement à un polypeptide glycosylé cible, une première sous-population daptamères se liant au polypeptide ou à la protéine glycosylée cible étant sélectionnée parmi une population doligonucléotides aléatoires qui ont au moins un nucléotide ayant un marqueur acide boronique lié à une base. Cette sous-population est ensuite amplifiée sans utiliser de TTP modifié par acide boronique, et les produits damplification ne se liant ni à un polypeptide ni à une protéine g
