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一种猪瘟重组亚单位疫苗的制备方法
- 专利权人:
- 中国农业科学院兰州兽医研究所
- 发明人:
- 刘湘涛,尹双辉,孙世琪,田宏,尚佑军,韩雪清,刘艳红
- 申请号：
- CN200810150304.0
- 公开号：
- CN101418303A
- 申请日:
- 2008.07.06
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2009
- 代理人:
- 鲜 林
- 摘要：
- 一种猪瘟重组亚单位疫苗的制备方法，包括下述步骤：A.利用逆转录-聚合酶链式反应方法克隆猪瘟疫苗株E2蛋白的编码基因；B.构建融合E2基因：C.构建重组表达载体rE2；D.rE2的诱导表达：E.rE2纯化。F.Western blotting方法检测rE2活性。本发明创造性地以双E2基因串联表达方式使E2抗原表位的数量增加一倍，显著提高了重组E2亚单位疫苗的免疫效果；为提高双E2蛋白表达效率，在第二个E2基因5′端起始密码子(ATG)上游增加一个大肠杆菌RBS序列(5′-AAGGAG-3′)；同时在串联的E2基因之间增加氨基酸接头5′-GSA GSAAGS GEF-3′，使获得的E2蛋白能够完整展示其抗原表位。本发明的E2蛋白重组亚单位疫苗，免疫保护效果与猪瘟兔化弱毒疫苗相当。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
