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一种溶瘤腺病毒的构建方法
专利权人:
复百澳(苏州)生物科技有限公司
发明人:
刘骏,徐金凤,金丽,周春艳,谢伟建
申请号:
CN201911097478.X
公开号:
CN110747228A
申请日:
2019.12.11
申请国别(地区):
CN
年份:
2020
代理人:
摘要:
本发明公开了一种溶瘤腺病毒的构建方法,包括以下步骤:步骤一:在NCBI数据库中调取Human mastadenovirus C全基因组序列信息和Tert‑p启动子序列,根据Tert‑p、E1A、E1B及的E1A和E1B之间的链接区域(FBLink)序列信息,在通用生物系统(安徽)有限公司进行化学合成至PUC57载体,得到PUC57‑Tert‑E1A‑FBLink‑E1B质粒;步骤二:设计引物对PUC57‑Tert‑E1A‑FBLink‑E1B质粒进行扩增;步骤三:腺病毒载体经SacII酶切;步骤四:同源重组法构建FV012‑Tert‑E1A‑FBLink‑E1B溶瘤腺病毒载体;步骤五:将步骤四得到的载体和腺病毒骨架质粒PBHG转染到细胞中进行病毒包装,待细胞出现病变后,得到目的溶瘤腺病毒。本发明获得的溶瘤腺病毒的复制能力和杀肿瘤细胞的能力要强于TERT‑E1A‑IRES‑E1B结构的溶瘤腺病毒。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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