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构建植物病毒弱病毒株的方法
- 专利权人:
- 浙江理工大学
- 发明人:
- 陈集双,竺锡武,金波,廖乾生,商晗武,陈海敏
- 申请号:
- CN200510048952.1
- 公开号:
- CN1286972C
- 申请日:
- 2005.01.12
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2006
- 代理人:
- 张法高
- 摘要:
- 本发明公开了一种构建植物病毒弱病毒株的方法。步骤如下:1)根据植物病毒卫星RNA两端保守序列,设计PCR引物,进行RT-PCR扩增,获得卫星RNA的cDNA,将全长卫星RNA的cDNA构建到质粒上,然后进行测序,确定其序列;2)将全长卫星RNA的cDNA或者序列改造后的cDNA进行体外转录,获得纯化的卫星RNA转录产物;3)预先接种强毒株至系统寄主,在接种叶或邻近叶片上,再接种上述体外转录的卫星RNA转录产物获得假重组,假重组后,取接种叶扩大接种,获得具备卫星RNA的弱病毒株。本发明的方法大大提高筛选植物病毒弱病毒株的速度,通过在cDNA水平上的卫星RNA序列改造,可以获得性状更优的卫星RNA变异株,提高卫星RNA介导的弱病毒保护效果,明显提高果实品质。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/