THE BROAD INSTITUTE, INC.;PRESIDENT AND FELLOWS OF HARVARD COLLEGE
发明人:
LIU, David R.,WILSON, Christopher Gerard,CHEN, Peter J.
申请号：
USUS2019/041051
公开号：
WO2020/014261A1
申请日:
2019.07.09
申请国别(地区):
US
年份:
2020
代理人:
摘要：
The disclosure provides programmable methylation "writers" and demethylation "erasers" for editing the methylation state of RNA targets, e.g., an RNA transcriptome. In particular, the disclosure provides RNA methylation editor polynucleotide contructs and vectors comprising (i) an RNA programmable RNA binding domain (RNApRNAbd)； and (ii) an effector domain, wherein the effector domain is capable of adding or removing a methyl group in an RNA. The disclosed RNA methylation editor constructs are capable of achieving limited off- target modifications in RNA molecules. Further, the disclosure provides methods for making and using the programmable methylation editors to modifying the methylation state of RNA. The disclosure further provides complexes comprising a methylation writer protein and a guide RNA molecule and complexes comprising a demethylation eraser protein and a guide RNA molecule. The disclosure further provides pharmaceutical compositions and cells comprising the disclosed fusion proteins and complexes.L'invention concerne des "éléments d'écriture " de méthylation et " des éléments d'effacement "de déméthylation programmables pour éditer l'état de méthylation de cibles d'ARN, par exemple d'un transcriptome d'ARN. En particulier, l'invention concerne des constructions polynucléotidiques et des vecteurs d'éditeur de méthylation d'ARN comprenant (I) un domaine de liaison à l'ARN programmable par ARN (RNApRNAbd) ； et (ii) un domaine effecteur, le domaine effecteur étant apte à ajouter ou à supprimer un groupe méthyle dans un ARN. Les constructions d'éditeur de méthylation d'ARN de l'invention sont aptes à obtenir des modifications hors cible limitées dans des molécules d'ARN. En outre, l'invention concerne des procédés pour la fabrication et l'utilisation des éditeurs de méthylation programmables en vue de modifier l'état de méthylation de l'ARN. L'invention concerne en outre des complexes comprenant une protéine d'écriture de méthylation et une molécule d'ARN
