本发明提供禾谷镰孢的特异性PCR扩增引物及检测体系,所述引物包括Fg18TF和Fg18TR(Seq ID No:1和2)以及一对巢式外引物HW18TF/HW18TR(Seq ID No:3和4)。本发明基于禾谷镰孢与其他镰孢种在β‑tubulin基因序列上的差异,设计出一系列检测禾谷镰孢的引物,从中筛选出特异性最强的引物Fg18TF/Fg18TR,并通过设计一对巢式外引物HW18TF/HW18TR来提高其检测灵敏度,在此基础上建立PCR检测体系,可从发病植物组织及土壤中复杂的病原菌环境快速、准确地检测出禾谷镰孢。根据该方法构建的检测试剂盒操作简便,特异性好,灵敏度高,可对禾谷镰孢的各种形态的繁殖体如菌丝、分生孢子等进行检测,对禾谷镰孢疫情的早期预警、疫区的病原监测等方面具有重要意义。