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一种抽提低拷贝质粒的方法
- 专利权人:
- 南京金斯瑞生物科技有限公司
- 发明人:
- 余鹏飞,王贞贞,曾雪飞,李胜华,徐士军,卢圣东,闵静,吴其根,梁艳
- 申请号:
- CN201610864971.X
- 公开号:
- CN106480016A
- 申请日:
- 2016.09.29
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 傅婷婷`夏平
- 摘要:
- 本发明公开了一种抽提低拷贝质粒的方法。一种抽提低拷贝质粒的方法,其特征在于挑取单菌落接种于含有相应抗生素的丰富培养基试管内,于37℃、220rpm,培养14‐17h至生长对数期,将培养的菌液扩大至300ml含有相应抗生素的丰富培养基,37℃、220rpm,培养2.5‐3h至OD600为1.5‐1.7,加入终浓度为150~200μg/ml的氯霉素,于37℃、220rpm诱导培养约14‐20h,然后常规抽提方法进行抽提。所述的常规抽提方法优选碱裂解法。本发明通过氯霉素诱导,大大提高了低拷贝质粒的抽提量,成功降低基因组污染发生概率,提升产品一次通过率。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/