Frank, Dr. Notka,Diana Hammer,Ralf, Prof. Dr. Wagner
申请号:
DE102004037611
公开号:
DE102004037611B4
申请日:
2004.08.03
申请国别(地区):
DE
年份:
2013
代理人:
摘要:
Verfahren zur verbesserten induzierbaren Genexpression, umfassend(i) Bereitstellen einer zu exprimierenden Zielnukleinsäuresequenz, die für ein therapeutisches und/oder diagnostisches Protein oder ein virales oder retrovirales TDN-Protein kodiert,(ii) Modifizieren der zu exprimierenden Zielnukleinsäuresequenz so dass eine Steigerung der Expression erreicht wird, wobei die Zielnukleinsäuresequenz durch Anpassen des Kodongebrauchs oder des GC-Gehalts der zu exprimierenden Zielnukleinsäuresequenz oder durch Eliminieren von die Transkription negativ beeinflussenden Motiven an das Expressionssystem angepasst wird,(iii) operatives Verknüpfen der modifizierten Zielnukleinsäuresequenz mit einer induzierbaren Transkriptionskontrollsequenz, wobei für die induzierbare Transkriptionskontrollsequenz ein induzierbarer natürlicher viraler oder Virus abgeleiteter Promotor oder ein induzierbarer artifizieller Promotor verwendet wird,(iv) Exprimieren der modifizierten Zielnukleinsäuresequenz in einem geeigneten Expressionssystem durch einen transaktiven Faktor.A method for improved inducible gene expression, comprising(i) providing a target nucleic acid sequence to be expressed for a therapeutic and / or diagnostic protein or a viral or retroviral tdn - protein,(ii) modifying the target nucleic acid sequence to be expressed so that an increase in the expression is achieved, the target nucleic acid sequence by adaptation of the codon usage, or of the gc - content of the target nucleic acid sequence or to be expressed by elimination of the transcription patterns which negatively influence on the expression system is adapted to,(iii) surgical linking of the modified target nucleic acid sequence with an inducible transcription control sequence, wherein for the inducible transcription control sequence of an inducible of natural viral or virus derived an inducible promoter or artificial promoter is used,(iv) express the modified target nucleic acid sequence in a suitable expression system