本发明涉及一种乙肝重组抗原及其表达基因、构建方法、病毒样颗粒及其制备方法、应用与疫苗,乙肝重组抗原由SEQ ID No.1所示的核苷酸序列组成的多核苷酸表达得到。本发明通过将乙型肝炎病毒的preS区域与流感病毒血凝素信号肽区以及流感病毒跨膜区和胞内区拼接在一起而得到的乙肝重组抗原表达基因,并将其成功表达后得到乙肝重组抗原,免疫原性较好,能够在对接种传统疫苗不能产生抗体的少数人(约5%~10%)人身上使免疫系统产生免疫应答。同时,基于preS区域对乙肝病毒的不可或缺的重要性,可以针对preS区域制备出适应人群更广的疫苗。能够对乙肝病毒起到预防感染和清除的作用,有潜力转化到医学上成为一种新颖的预防性和治疗性乙肝疫苗。