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一种β-酪蛋白位点定点整合Lys基因的打靶载体及其构建的细胞
- 专利权人:
- 西北农林科技大学;杨凌科元克隆股份有限公司
- 发明人:
- 张涌,刘旭,王勇胜,郭文江,权富生
- 申请号：
- CN201310126017.7
- 公开号：
- CN103215295B
- 申请日:
- 2013.04.11
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 汪人和
- 摘要：
- 本发明公开了一种β-酪蛋白位点定点整合Lys基因的打靶载体及其构建的细胞，包括目的基因Lys，在的基因Lys的上游和下游分别设有5’同源臂和3’同源臂，以牛β-酪蛋白位点第二内含子锌指核酸酶识别位点的上下游各延伸700～850bp的同源序列作为5’同源臂和3’同源臂。本发明使用电穿孔的方法将打靶载体pCSN2-Lys-Neo-EGFP和锌指核酸酶表达载体共转染牛胎儿成纤维细胞，经过G418药物筛选和PCR分析后获得了打靶的阳性克隆细胞，以打靶的阳性克隆细胞为核供体移入牛去核卵母细胞，获得转基因克隆胚胎，为研制抗乳房炎的转基因奶牛提供坚实的基础。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
