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一种无外源标记基因的抗PCV2转基因猪制备方法
- 专利权人:
- 华南农业大学
- 发明人:
- 李紫聪,黄晓灵,吴珍芳,刘德武,蔡更元,郑恩琴
- 申请号：
- CN201710321613.9
- 公开号：
- CN107177630A
- 申请日:
- 2017.05.09
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 高之波`李波
- 摘要：
- 本发明公开了一种无外源标记基因的抗PCV2转基因猪制备方法。该无外源标记基因的抗PCV2转基因猪是通过将目的基因(抗PCV2 siRNA序列)与外源标记基因(Neo/EGFP融合表达基因)构建共表达载体，并通过转染、体细胞克隆等技术获得F0代抗PCV2转基因猪，并将获得的F0代转基因猪进行配种获得F1抗PCV2转基因猪，对F1代抗PCV2转基因猪进行鉴定，筛选出合适的F1转基因猪提取耳皮成纤维细胞，进行建系，并用HTNCre重组酶筛选出删除了Neo/EGFP外源标记基因的细胞系，并利用该细胞系进行体细胞克隆，最终获得无外源标记基因的抗PCV2转基因猪。该转基因猪删除了外源标记基因，减少了外源基因对转基因猪个体健康的影响，同时也可以简化转基因猪安全评价程序，有利于该转基因猪的产业化推广及应用。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
