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环介导等温扩增技术LAMP检测霍乱弧菌mdh基因及其检测试剂盒
- 专利权人:
- 深圳出入境检验检疫局食品检验检疫技术中心
- 发明人:
- 匡燕云,叶卫翔,范放,朱海,吕敬章,赵芳,洪小柳,刘慧玲,万志刚,马淑棉,黄李华,宋志强
- 申请号：
- CN200910107466.0
- 公开号：
- CN101892293A
- 申请日:
- 2009.05.22
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2010
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明属于生物技术应用领域，用于测定微生物，涉及一种基于环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification，LAMP)技术的霍乱弧菌快速检测技术。本发明通过计算机软件分析霍乱弧菌保守和特异性基因序列，设计出四条引物完全与识别的靶序列中六个结合区匹配，该方法利用一种链置换DNA聚合酶-Bst(Bacillus stearothermophilus)DNA polymerase在恒温(65℃)的条件下反应1小时即可完成核酸扩增反应，通过荧光染色直接目测比色就可以得到清晰的反应结果，进而确定标本中是否存在霍乱弧菌。该试剂盒内有环介导等温扩增反应液、Bst DNA聚合酶、显色剂；反应液含有反应缓冲液、dNTP、硫酸镁、上游内引物、下游内引物、上游外引物、下游外引物和甜菜碱；检测霍乱弧菌的方法包括细菌DNA的提取、霍乱弧菌的环介导等温扩增、显色检测。其特点是特异性、敏感性高、检测时间短和检测成本比普通PCR低。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
