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一种猪瘟病毒C株EST敏感细胞系的选育方法
专利权人:
陕西溯源农业发展有限公司
发明人:
敬晓棋,魏衍全,黄光东,张琼,陈生叶
申请号:
CN201410334023.6
公开号:
CN104099292B
申请日:
2014.07.11
申请国别(地区):
中国
年份:
2017
代理人:
摘要:
本发明公开了一种猪瘟病毒C株EST敏感细胞系的选育方法,包括以下步骤:(1)EST细胞单克隆化:无外源微生物污染的EST细胞,以CSFV C株感染,37℃5%CO2条件下培养48h后,经0.25%胰蛋白酶消化成分散的单个细胞后进行连续4倍梯度稀释,种于96孔细胞板,37℃5%CO2条件下培养,8小时后观察每孔,排除存在细胞团的培养孔,然后继续培养1周,挑选由单一细胞克隆化生长的细胞孔,将孔中细胞进行亚克隆筛选,连续以此方法亚克隆筛选3次后获得亚克隆细胞系。本发明简化传统细胞苗生产过程中的单次接毒程序,为猪瘟细胞苗的生产缩短周期和降低成本。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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