一种猪瘟病毒C株EST敏感细胞系的选育方法
- 专利权人:
- 陕西溯源农业发展有限公司
- 发明人:
- 敬晓棋,魏衍全,黄光东,张琼,陈生叶
- 申请号:
- CN201410334023.6
- 公开号:
- CN104099292B
- 申请日:
- 2014.07.11
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明公开了一种猪瘟病毒C株EST敏感细胞系的选育方法,包括以下步骤:(1)EST细胞单克隆化:无外源微生物污染的EST细胞,以CSFV C株感染,37℃5%CO2条件下培养48h后,经0.25%胰蛋白酶消化成分散的单个细胞后进行连续4倍梯度稀释,种于96孔细胞板,37℃5%CO2条件下培养,8小时后观察每孔,排除存在细胞团的培养孔,然后继续培养1周,挑选由单一细胞克隆化生长的细胞孔,将孔中细胞进行亚克隆筛选,连续以此方法亚克隆筛选3次后获得亚克隆细胞系。本发明简化传统细胞苗生产过程中的单次接毒程序,为猪瘟细胞苗的生产缩短周期和降低成本。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心