F. HOFFMANN-LA ROCHE AG;ROCHE DIAGNOSTICS OPERATIONS, INC.;ROCHE DIAGNOSTICS GMBH
发明人:
ENGEL, Alfred,GREIF, Michael,JUNG, Christine,MALIK, Sebastian,MUELLER, Rainer,SOBEK, Harald,SUPPMANN, Bernhard,THOMANN, Marco
申请号：
EPEP2014/060101
公开号：
WO2014/191240A1
申请日:
2014.05.16
申请国别(地区):
EP
年份:
2014
代理人:
摘要：
The present disclosure is directed to the use of certain glycosyltransferase variants having N-terminal truncation deletions. Contrary to previous findings certain truncations were found to exhibit sialidase enzymatic activity, particularly a variant of human sialyltransferase (hST6Gal-I) with a truncation deletion involving the first 89 N-terminal amino acids of the respective wild-type polypeptide. A fundamental finding documented in the present disclosure is that there exists a variant of this enzyme which is capable of catalyzing transfer of a glycosyl moiety as well as hydrolysis thereof. Thus, disclosed is a specific exemplary variant of mammalian glycosyltransferase, nucleic acids encoding the same, methods and means for recombinantly producing the variant of mammalian glycosyltransferase and use thereof, particularly for sialylating in a quantitatively controlled manner terminal acceptor groups of glycan moieties being part of glycoproteins such as immunoglobulins.La présente invention concerne l'utilisation de certains variants de glycosyltransférase ayant des délétions par troncature N-terminale. En contradiction avec des découvertes précédentes, on a observé que certaines troncatures présentaient une activité enzymatique sialidase, en particulier un variant de sialyltransférase humaine (hST6Gal-I) avec une délétion par troncature impliquant les 89 premiers acides aminés N-terminaux du polypeptide sauvage respectif. Une découverte fondamentale exposée dans la présente description est qu'il existe un variant de cette enzyme qui est capable de catalyser le transfert d'une partie gycosyle ainsi que son hydrolyse. Ainsi, l'invention concerne un exemple de variant spécifique de glycosyltransférase de mammifère, des acides nucléiques le codant, des procédés et des moyens pour produire par recombinaison le variant de glycosyltransférase de mammifère et son utilisation, en particulier pour sialyler de manière quantitativement régulée des groupes accepteurs termina
