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在毕赤酵母中进行重组乙醇氧化酶的表达与纯化的方法
- 专利权人:
- 浙江德清汇宁生物科技有限公司
- 发明人:
- 徐志南,刘云平,朱建忠
- 申请号：
- CN201210038196.4
- 公开号：
- CN102533808B
- 申请日:
- 2012.02.20
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 张欢勇
- 摘要：
- 本发明公开了一种重组乙醇氧化酶rAOX的表达与纯化的方法。本发明运用分子生物学技术先构建乙醇氧化酶-多聚组氨酸表达载体pPIC9K-AOX-HIS，然后将其线性化后转入毕赤酵母GS115中，从而获得能够表达有活性的重组乙醇氧化酶的毕赤酵母工程菌，且重组乙醇氧化酶可以部分分泌表达。通过对重组乙醇氧化酶表达条件进行优化，该工程菌生产的乙醇氧化酶可达到1862U/L。同时，酶的分泌表达与多聚组氨酸标签的引入简化了重组乙醇氧化酶的纯化工艺。通过测定，该工程菌表达的重组乙醇氧化酶热稳定性较毕赤酵母野生型乙醇氧化酶有很大的提高。本发明的整个过程操作简单，可适合于工业化生产，可带来一定经济效益。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
