本发明涉及一种重组细菌素及其制备方法和应用,属于生物技术领域。本发明重组细菌素LacAB基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述重组表达载体pGEX‑4T‑1‑LacAB包含SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明将含有重组表达载体pGEX‑4T‑1‑LacAB的大肠杆菌BL21经IPTG诱导目的蛋白表达,收集菌液,提取菌液中的重组蛋白,得到的重组蛋白溶液通过GST纯化柱,GST标签和柱子上的GST亲和蛋白结合,通过洗脱液得到纯化的GST‑LacAB蛋白,用凝血酶切除GST标签后,用GST纯化试剂盒纯化,得到单一的重组细菌素LacAB。本发明的重组细菌素抗菌活性及稳定性好,抑菌谱广,可作为理想的抗生素替代品和人畜生物性药物、饲料添加剂、防腐剂、消杀剂等。