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一种Prestin基因突变致聋小鼠模型的制备方法
- 专利权人:
- 山东大学
- 发明人:
- 高建刚,张剑,左坚,刘学忠
- 申请号：
- CN201210116788.3
- 公开号：
- CN102634536A
- 申请日:
- 2012.04.19
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 李健康
- 摘要：
- 本发明公开了一种Prestin基因突变致聋小鼠模型的制备方法，是构建出Prestin突变基因打靶载体pLP-KI；然后将其线性化后转染129/S6的ES细胞，利用PCR法扩增并测序鉴定ES克隆是否发生突变，筛选出发生正确同源重组的ES细胞克隆；再利用显微注射技术将鉴定正确的ES细胞注入C57BL/6小鼠的囊胚中，获得嵌合体小鼠，再将其与C57BL/6小鼠交配，产生出棕色和黑色后代小鼠；对棕色小鼠用Long PCR方法筛选出阳性小鼠，再将阳性小鼠与EIIa-Cre小鼠交配，通过PCR筛选得到杂合型F1代小鼠；将杂合型F1代小鼠自交得到F2代小鼠，再筛选出纯合F2代小鼠，即为Prestin点突变致聋小鼠模型；本发明的Prestin基因突变致聋小鼠模型可用于研究Prestin突变致聋的分子病理机制，解答尚待解决的Prestin功能的基础问题。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
