本发明提供了一种预防肿瘤发生的免疫细胞培养基及其制备方法与应用。本发明首先提供一种培养基组合物,其可用于免疫细胞TPKT(Tumor Prevention Killer T Cells)的培养,其组分包括:A液和B液;其中,A液组成成分包括:基础培养基、IL‑2、IFN‑γ、GMCSF;还可进一步包括TNF‑α;B液组成成分包括:基础培养基、IL‑2、IFN‑γ;还可进一步包括IL‑12。本发明的培养基用于针对可识别、清除机体内表达变异蛋白的肿瘤前体细胞及影像学不可见得微小肿瘤的TPKT细胞的培养,可使免疫细胞的增殖速度更快、识别及免疫功能更强。