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THERMOSTABLE NUCLEASE
专利权人:
UNIVERSITE LAVAL
发明人:
BOISSINOT, Maurice,BOISSINOT, Karel,ISABEL, Sandra,SHI, Lu-E
申请号:
CACA2014/000156
公开号:
WO2014/131113A1
申请日:
2014.02.27
申请国别(地区):
WO
年份:
2014
代理人:
摘要:
The present invention provides a heat-stable nuclease found in Y. enterocolitica subsp. palearctica that is active in broad spectrum conditions. Using the genome sequences of Y. enterocolitica subsp. enterocolitica, we identified one nuclease named Nucyep. This gene was sequenced in a strain Y. enterocolitica subsp. palearctica, cloned, and expressed in E.coli, and then purified and characterized. The molecular weight of this enzyme is about 30 to 32 kDa. The translation product, a nuclease referred to as "Nucyep" is biologically active. The purified Nucyep1 exhibits non-specific nuclease activity, being able to degrade various nucleic acids, including RNA, single-stranded DNA (ssDNA) and linear or circular double-stranded DNA (dsDNA). This enzyme is active in a wide range of temperatures, from 0 to 100°C. The enzyme is active in a wide range of pH values from 3.6 to 9.9, and keeps greater than 75% of the activity at pH 7.24. This enterobacterial nuclease has unique levels of intrinsic resistance to heat, and is active under a large spectrum of conditions.La présente invention concerne une nucléase stable à la chaleur que lon trouve dans Y. enterocolitica subsp. palearctica qui est active dans des conditions de large spectre. Lutilisation des séquences génomiques de Y. enterocolitica subsp. enterocolitica à permis didentifier une nucléase nommée Nucyep. Ce gène a été séquencé dans un brin de Y. enterocolitica subsp. palearctica, cloné et exprimé dans E.coli, puis purifié et caractérisé. Le poids moléculaire de cette enzyme est denviron 30 à 32 kDa. Le produit de la traduction, une nucléase désignée par « Nucyep », est biologiquement actif. Le produit Nucyep1 purifié montre une activité nucléase non spécifique et est susceptible de dégrader divers acides nucléiques, y compris lARN, lARN simple brin (ssDNA) et lARN double brin (dsDNA) linéaire ou circulaire. Cette enzyme est active dans une large plage de températures, allant de 0 à 100 °C. Lenzyme est active dans un
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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