一种抑制口蹄疫病毒增殖的猪IFITM3基因及构建方法和应用

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专利权人:

华中农业大学

发明人:

钱平,李祥敏,许晋芳,刘莎莎,周锐,金梅林,陈焕春

申请号：

CN201110191092.2

公开号：

CN102286465A

申请日:

2011.07.08

申请国别(地区):

中国

年份:

2011

代理人:

王敏锋

摘要：

本发明公开了一种抑制口蹄疫病毒增殖的猪IFITM3基因及构建方法和应用，其步骤A、猪IFITM3基因的合成：设计引物，提取猪的淋巴结组织RNA，进行RT-PCR扩增sIFITM3基因，扩增，利用pCA-sIFITM3转染BHK-21细胞，通过共聚焦显微镜观察该蛋白表达于细胞膜；B、表达sIFITM3基因的慢病毒的构建以及纯化；C、稳定表达sIFITM3基因的BHK21-sIFITM3eGFP细胞系的构建：构建稳定表达sIFITM3的BHK-21细胞系，利用Lentivirus-sIFITM3eGFP和LentiviruseGFP分别转导BHK-21细胞，通过绿荧光进行克隆筛选，通过RT-PCR和Westernblotting鉴定sIFITM3的表达，为BHK21-sIFITM3eGFP。该基因、细胞系BHK21-sIFITM3eGFP、慢病毒Lentivirus-sIFITM3和真核质粒pCA-sIFITM3在制备治疗或预防口蹄疫病毒药物中的应用。构建的BHK21-sIFITM3eGFP细胞系能稳定表达sIFITM3蛋白、BHK21-sIFITM3eGFP能够抑制口蹄疫病毒复制、携带sIFITM3基因的慢病毒lentivirus-sIFITM3和真核质粒pCA-sIFITM3在机体水平能够抑制口蹄疫病毒复制。

来源网站：

中国工程科技知识中心

来源网址：

http://www.ckcest.cn/home/