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一种重组荞麦谷氧还蛋白及其制备方法和应用
- 专利权人:
- 山西大学
- 发明人:
- 王宏飞,张新瑀,王文明,王转花
- 申请号：
- CN201610536725.1
- 公开号：
- CN106119217A
- 申请日:
- 2016.07.08
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 张福增
- 摘要：
- 本发明提供了一种重组荞麦谷氧还蛋白及其制备方法和应用。制备方法：将重组荞麦谷氧还蛋白(rbGrx)基因构建到pGEX‑6p‑1载体上，转化到大肠杆菌BL21(DE3)中，诱导表达连接有GST的融合蛋白；酶切后使用阴离子交换柱与凝胶柱进一步纯化，获得纯度98％以上的重组rbGrx蛋白。进而在pH 4.5，22％PEG3350(W/V)和0.1M CH3COONa的结晶化条件下,培养获得rbGrx蛋白与谷胱甘肽(GSH)复合物晶体，并利用X射线单晶衍射的方法测定其结构，可清晰分辨出与催化活性相关的重要氨基酸残基，从而可以有目的地调控其稳定性及酶的活力。本发明重组荞麦谷氧还蛋白具有高的巯基转移酶活性，酶比活力为300U/mg。其可在催化巯基转移反应中应用，其晶体及其结构在医疗保健和食品开发等方面也具有实用价值。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
