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酶解法提取及培养人脐带间充质干细胞的方法
- 专利权人:
- 北京焕生汇生物技术研究院
- 发明人:
- 姚玲玲,孟得龙,杨苗,宋丹,刘得娟
- 申请号：
- CN201711386935.8
- 公开号：
- CN108165526A
- 申请日:
- 2017.12.20
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 魏秀枝
- 摘要：
- 本发明公开了酶解法提取及培养人脐带间充质干细胞的方法，包括以下步骤：先取脐带组织，然后分离出华通氏胶，接下来将华通氏胶切割成组织匀浆并转入离心管中，按体积比1：1的比例加入预温的0.1％胶原酶I，放入到CO2培养箱中在37℃条件下进行恒温酶解，每隔20min剧烈震荡一次，当组织块已被酶解成糊状时停止酶解，抽取酶解液贴着400目细胞筛进行过滤，向滤液中补加PBS重悬细胞，离心去上清，再用PBS重悬细胞并离心洗涤，最后用细胞培养液将细胞重悬并转移至T75培养瓶中培养。本发明的有益之处在于：采用较低浓度(0.1％)的胶原酶I进行酶解，不仅减小了对细胞的损伤，同时降低了提取及培养的成本。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
