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一种高效提取用于PCR扩增的地下水微生物DNA的方法
- 专利权人:
- 内蒙古科技大学
- 发明人:
- 张雪峰,郑春丽,王建英,杨彪,姚卫华,高晓玲,林忠,吕保义
- 申请号:
- CN201310288695.3
- 公开号:
- CN103333883B
- 申请日:
- 2013.07.11
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 蒋常雪
- 摘要:
- 本发明公开了一种高效提取用于PCR扩增的地下水微生物DNA的方法,该方法的步骤为:第一步收集地下水微生物,用无菌微孔滤膜收集微生物,再用含有十六烷基三甲基溴化铵的缓冲液将微生物洗脱下来制得微生物细胞液;第二步裂解地下水微生物细胞,向微生物细胞液中加入溶菌酶和蛋白酶K进行细胞裂解,温水水浴后离心,得到细胞裂解上清液;第三步纯化细胞裂解液,将细胞裂解上清液进行多次离心纯化后,得到粗提DNA溶液;第四步纯化微生物基因组DNA,将粗提DNA溶液进行离心纯化、用体积浓度为70%的乙醇抽提后得到纯化的微生物基因组DNA。本发明方法能够高效提取出高质量的地下水微生物基因组DNA,操作简单,提取纯度高。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/