The present disclosure relates to an oncolytic adenovirus, comprising: (i) a first transgene comprising a DNA sequence which encodes a first protein, (ii) a second transgene encoding a protein or fragment comprising a transmembrane domain or GPI anchor, and (iii) a third transgene encoding a third protein wherein the three transgenes are located between the virus fibre gene L5 and the virus E4 gene and wherein the said transgenes are under the control of a promoter endogenous to the virus, such as the major late promoter, and the relative location of the second transgene is between the first and third transgene, compositions comprising the same and use of the virus and compositions in treatment, particularly in the treatment of cancer.Linvention concerne un adénovirus oncolytique comprenant : (i) un premier transgène comprenant une séquence dADN codant pour une première protéine, (ii) un deuxième transgène codant pour une protéine ou un fragment comprenant un domaine transmembranaire ou un ancrage GPI, et (iii) un troisième transgène codant pour une troisième protéine les trois transgènes étant situés entre le gène de fibre virale L5 et le gène E4 du virus et lesdits transgènes étant sous le contrôle dun promoteur endogène au virus, tel que le promoteur tardif majeur, et lemplacement relatif du deuxième transgène étant entre le premier et le troisième transgène. Linvention concerne également des compositions le comprenant, ainsi que lutilisation de ces virus et compositions dans le traitement du cancer en particulier.
