LANNER, Fredrik,PLAZA REYES, Alvaro,PETRUS REURER, Sandra,SÁNCHEZ, Sara Padrell
申请号：
EPEP2019/066285
公开号：
WO2019/243462A1
申请日:
2019.06.19
申请国别(地区):
EP
年份:
2019
代理人:
摘要：
Method comprises providing a culture of human pluripotent stem cells adherent on a first substrate comprising a first laminin； exposing the stem cells to a differentiation medium for a first time period of 15 days to 50 days to obtain a first population of adherent cells comprising RPE cells and/or progenitors thereof； at the end of the first time period, dissociating the first population from the first substrate； replating the dissociated first population of cells on a second substrate comprising a second laminin； and culturing the replated first population of cells on the second substrate for a second time period to obtain an expanded and matured second population of cells comprising the RPE cells. The first and second laminins may be independently selected from LN-521, LN-511, LN-111 and LN-121, and are an intact protein or protein fragment. Cell surface markers useful for in vitro generation of RPE cells selected from CD140b, CD56, CD104, CD164, CD220, EGER, GD2, CD184, CD10, CD30, CD49a, CD49b, CD50, CD171, TRA-1-60 and CD326, preferably CD140b, CD56, GD2 and/or CD184. Also included are RPE cells so produced as well as materials and compositions utilizing such RPE cells for various treatments.La présente invention concerne un procédé qui comprend la fourniture d'une culture de cellules souches pluripotentes humaines adhérentes sur un premier substrat comprenant une première laminine； l'exposition des cellules souches à un milieu de différenciation pendant une première durée de 15 jours à 50 jours pour obtenir une première population de cellules adhérentes comprenant des cellules RPE et/ou des progéniteurs de celles-ci； à la fin de la première période de temps, la dissociation de la première population du premier substrat； le ré-étalement de la première population de cellules dissociées sur un second substrat comprenant une seconde laminine； et la culture de la première population de cellules ré-étalée sur le second substrat pendant une seconde période de temps
