检测马铃薯纺锤块茎类病毒的real-time RT-PCR特异引物及探针和检测方法,它涉及检测引物、检测探针及其检测方法。本发明的检测引物序列如序列表Seq ID No:1所示和Seq ID No:2所示,探针序列如序列表Seq ID No:3所示。检测方法为:一、提取待检测的提取马铃薯块茎和试管苗RNA,并反转录为cDNA,作为模板;二、采用引物及探针,当扩增效率达到90%~110%,斜率为-3.3,阴性对照不起峰时,根据标准曲线及Cp值计算马铃薯纺锤块茎类病毒的含量,通过real-time RT-PCR进行分析直接进行结果判断。与RT-PCR相比检测灵敏度又提升了100~1000倍。