本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种利用CHO细胞生产重组蛋白的基因表达系统及真核表达载体。本发明提供一种pHLX201真核表达载体，包括GS表达单元，所述GS表达单元的序列包括5’至3’方向依次排列的SV40L启动子基因序列、谷氨酰胺合成酶基因序列，所述SV40L启动子基因序列如SEQ ID NO：2所示；所述谷氨酰胺合成酶基因序列如SEQ ID NO：3所示。本发明所提供的表达系统能够实现外源基因在CHO细胞基因组中的整合和高效表达。该系统的制备方法主要包括：构建真核表达载体，适合于目的基因在CHO细胞中的瞬时表达，并适合于目的基因高表达细胞株筛选。利用本发明的CHO表达系统可以实现重组蛋白、单克隆抗体等在CHO细胞中的整合和表达，具有广阔的应用前景。
