本发明公开了一种甘蓝叶片小RNA的提取方法,包括以下步骤:甘蓝叶片采集,液氮速冻,-80℃保存待用;液氮研磨甘蓝叶片至粉末状,加入裂解液进行样品预处理;离心取上清,并加入裂解液等体积小RNA提取液,震荡混匀后室温静置5min;离心取上清,并加入1/5上清体积的氯仿和异戊醇混合液抽提;离心取上清,加入与上清等体积的异丙醇沉淀,放于-20℃沉淀1h;离心弃上清,沉淀用75%乙醇清洗,干燥后,用适量RNase free ddH2O溶解沉淀,得到甘蓝叶片小RNA。本发明先对样品进行预处理,再以RNAiso for Small RNA为提取液,对小RNA进行提取,获得了高质量的小RNA,为加速甘蓝小RNA研究奠定基础,而且本发明具有快速、稳定、操作简便等特点,具有广泛的应用前景。