本发明适用于物医学领域,提供了一种稳定表达H1N1流感病毒RNPs的Hela细胞株的构建方法,包括以下步骤:构建重组质粒pcDNA3.1/Zeo-PB1、pcDNA3.1/Hygro-PB2、pcDNA3.1/Neo-PA、pEF6/V5-HisA-NP;获取四种抗生素Zeocin、Hygromycin B、Geneticin、Blasticidin S HCl感染Hela细胞的最佳筛选浓度;将所述重组质粒pcDNA3.1/Zeo-PB1、pcDNA3.1/Hygro-PB2、pcDNA3.1/Neo-PA、pEF6/V5-HisA-NP分次转染Hela细胞,筛选获得Hela-RNP细胞株。