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PRODUCTION D'AAV DANS DES CELLULES D'INSECTES, MÉTHODES ET COMPOSITIONS ASSOCIÉES
专利权人:
VIROVEK; INC
发明人:
CHEN, Haifeng
申请号:
USUS2017/028660
公开号:
WO2017/184879A1
申请日:
2017.04.20
申请国别(地区):
US
年份:
2017
代理人:
摘要:
Compositions and methods are disclosed for producing adeno-associated virus (AAV) in insect cells in vitro. Recombinant baculovirus vectors include an AAV Capsid gene expression cassette (Cap), an AAV Rep gene expression cassette (Rep), and a baculovirus homologous region (hr) located up to about 4 kb from a start codon in an AAV expression cassette. Production levels of baculovirus and AAV in insect cells harboring recombinant baculovirus comprising a Cap, a Rep, and an hr are higher compared to controls comprising a Cap and a Rep but no hr. Furthermore, levels of baculovirus and AAV production in insect cells infected with recombinant baculovirus comprising a Cap, a Rep, and an hr are comparatively stable over serial passages of cells, whereas levels of baculovirus and AAV production decline over serial passages of insect cells comprising recombinant baculovirus comprising a Cap and a Rep, but no hr.La présente invention concerne des compositions et des méthodes permettant de produire des virus adéno-associés (AAV) dans des cellules d'insectes in vitro. Les vecteurs de baculovirus recombinants comprennent une cassette d'expression du gène de la capside d'AAV (Cap), une cassette d'expression du gène Rep d'AAV (Rep), et une région homologue de baculovirus (hr) située jusqu'à environ 4 kb d'un codon de départ dans une cassette d'expression d'AAV. Les niveaux de production de baculovirus et d'AAV dans des cellules d'insectes hébergeant un baculovirus recombinant comprenant un Cap, un Rep et un hr sont supérieurs aux niveaux obtenus avec les contrôles comprenant un Cap et un Rep mais pas de hr. En outre, les niveaux de production de baculovirus et d'AAV dans des cellules d'insectes infectées par un baculovirus recombinant comprenant un Cap, un Rep et un hr sont comparativement stables au cours des passages en série des cellules, alors que les niveaux de production de baculovirus et d'AAV diminuent au cours des passages en série des cellules d'insectes comprenant un bac
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/
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