EUROPÄISCHES LABORATORIUM FÜR MOLEKULARBIOLOGIE (EMBL);MAX-PLANCK-GESELLSCHAFT ZUR FÖRDERUNG DER WISSENSCHAFTEN EV
发明人:
LENDECKEL WINFRIED,WILM MATTHIAS,TUSCHL THOMAS,ELBASHIR SAYDA MAHGOUB,LÜHRMANN REINHARD
申请号：
NO20130246
公开号：
NO335426B1
申请日:
2013.02.14
申请国别(地区):
NO
年份:
2014
代理人:
摘要：
Double-stranded RNA (dsRNA) induces sequence-specific post-transcriptional gene silencing in many organisms by a process known as RNA interference (RNAi). Using a Drosophila in vitro system, we demonstrate that 19-23 nt short RNA fragments are the sequence-specific mediators of RNAi. The short interfering RNAs (siRNAs) are generated by an RNase III-like processing reaction from long dsRNA. Chemically synthesized siRNA duplexes with overhanging 3' ends mediate efficient target RNA cleavage in the lysate, and the cleavage site is located near the center of the region spanned by the guiding siRNA. Furthermore, we provide evidence that the direction of dsRNA processing determines whether sense or antisense target RNA can be cleaved by the produced siRNP complex.Dobbelttrådet RNA (dsRNA) induserer sekvensspesifikk posttranskripsjonell geninaktivering i mange organismer med en prosess kjent som RNA-interferens (RNAi). Ved å anvende et Drosophila in vitro-system demonstrerer vi at 19-23 nt korte RNA- fragmenter er de sekvensspesifikke mediatorene av RN Ai De korte, interfererende RNA'ene (siRNA'ene) genereres ved en RNase lll-lignende prosesseringsreaksjon fra langt dsRNA. Kjemisk syntetiserte siRNA-duplekser med overhengende 3'ender medierer effektiv mål- RNA kutting i lysatet, og kuttesetet er lokalisert nær senteret til regionen dekket av guide-siRNA'et. Videre tilveiebringer vi bevis for at dsRNA-prosesseringsretningen avgjør hvorvidt sens- eller antisens mål-RNA kan bli kuttet med det dannede siRNP-komplekset.
