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重组表达载体及其构建方法和应用
专利权人:
华中农业大学
发明人:
马美湖,张茂杰,耿放,李述刚,黄群,靳国峰
申请号:
CN201710371937.3
公开号:
CN107354172A
申请日:
2017.05.24
申请国别(地区):
CN
年份:
2017
代理人:
摘要:
本发明公开了一种优化的动物蛋白基因OCX‑36及其原核表达载体的构建方法和应用,采取的技术方案是对OCX‑36基因稀有密码子进行改造优化,并切除了信号肽,将优化的OCX‑36基因与载体连接,构建重组质粒pMD‑19T‑OCX‑36,转入到大肠杆菌C41(DE3)感受态细胞中,筛选阳性克隆进行培养、蛋白表达,菌体细胞超声破碎、离心、收集上清液经一次镍柱亲和层析即可获得蛋白rOCX‑36。本发明通过对OCX‑36基因序列的优化,实现了蛋白rOCX‑36的可溶性表达,解决了其难于原核表达的技术问题,表达蛋白对患有结肠炎的小鼠具有明显改善病情的效果,显示rOCX‑36可用于制备治疗结肠炎的药物。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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