The present invention provides methods for generating mammalian T cell populations comprising antigen-specific CD4+CD25+ regulatory T cells from freshly isolated CD4+CD25- T cells. The method comprises selecting CD4+CD25- T cells from a sample obtained from a mammalian subject determining the MHC Class II type of the subject inducing the generation of antigen-specific regulatory T cells by contacting the isolated CD4+CD25- T cells in a culture vessel with an induction agent for a time period sufficient to generate antigen-specific CD4+CD25+ regulatory T cells and selecting the CD4+CD25+ antigen-specific regulatory T cells by sorting the cells in the induction culture with a selection agent comprising at least one artificial multimeric MHC Class II/peptide complex that corresponds to the MHC Class II type of the subject.Linvention concerne des méthodes pour générer des populations de cellules T de mammifère comprenant des cellules T de régulation CD4+CD25+ spécifiques à un antigène, à partir de cellules T CD4+CD25- fraîchement isolées. La méthode de linvention consiste à sélectionner des cellules T CD4+CD25- dans un échantillon prélevé sur un mammifère à déterminer le type II de classe MHC du mammifère à induire la génération de cellules T de régulation spécifique à un antigène par la mise en contact des cellules T CD4+CD25- isolées dans un contenant de culture et dun agent dinduction pendant une période suffisante pour générer des cellules T de génération CD4+CD25+ spécifiques à un antigène et à sélectionner les cellules T de régulation spécifiques à un antigène CD4+CD25+ par le tri des cellules de la culture dinduction au moyen dun agent de sélection comprenant au moins un complexe multimère artificiel de classe II MHC/peptidique correspondant au type de classe II MHC du mammifère.