一种牛PDHB基因腺病毒干扰载体构建及其鉴定方法

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专利权人:

西北农林科技大学

发明人:

李安宁,昝林森,武丽娟,王晓宇

申请号：

CN201710018350.4

公开号：

CN106811484A

申请日:

2017.01.11

申请国别(地区):

中国

年份:

2017

代理人:

黄伟洪

摘要：

本发明公开了一种牛PDHB基因腺病毒干扰载体构建及其鉴定方法，序列为：SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3。构建方法包括：载体用BamH I，EcoR I双酶切；酶切完成后胶回收；目的片断利用3’和5’的单链退火获得：目的片段与载体连接反应；转化感受态细胞:DH5a；转化后挑菌，摇菌14小时，测序；将重组腺病毒载体质粒PDHB shRNA与pHBAd‑BHG骨架载体共转染HEK293A细胞，获得重组腺病毒Ad‑PDHB shRNA。本发明的shRNA1、shRNA2和shRNA3对PDHB基因的干扰效率分别为：95.12％、12.69％和97.76％。

来源网站：

中国工程科技知识中心

来源网址：

http://www.ckcest.cn/home/