The present application discloses an immunogenic composition comprising a Hib saccharide conjugate and at least two further bacterial saccharide conjugates wherein the Hib conjugate is present in a lower saccharide dose than the mean saccharide dose of all the at least two further bacterial saccharide conjugates.본원 발명은 카르보디이미드 축합 화학을 이용한 당류-단백질 컨주게이션 반응을 수행하기 위한 개선된 방법을 개시한다. 관련된 당류 또는 담백질 담체의 특성에 따라 달라질 수 있지만, 상기 컨주게이트의 품질은 반응 혼합물에 천천히 반응 성분들 중 어느 한 성분을 첨가함으로써 개선될 수 있다. 본원 발명에 의해 개시된 방법들로 제조된 당류-단백질 컨주게이트를 포함하는 면역원성 조성물이 추가로 제공된다.