The present invention relates to a method for separating tacrolimus from a mixed solution of tacrolimus and ascomycin by using a mosi- cation bed chromatography. Specifically, the adsorption rate of tacrolimus and ascomycin for the adsorption resin in the adsorption column is calculated. (Step 1)； Calculating a process condition of a simulated movie bed (SMB) chromatography process by applying the adsorption rate calculated in step 1 to a triangular theory (step 2)； And separating the tacrolimus by supplying the raw material solution in which tacrolimus and ascomycin are mixed to the mosai copper layer chromatography and the eluent and applying the process conditions calculated in step 2 (step 3). Provided is a method of separating tacrolimus from a mixed solution of tacrolimus and ascomycin using photography. Separation of tacrolimus from the mixed solution of tacrolimus and ascomycin by using the mosidong mobile layer chromatography according to the present invention is a separation method that can be used commercially, can greatly reduce the amount of the solvent used as the eluent, high purity Tacrolimus of the high yield is easy to mass production is effective.본 발명은 모사이동층 크로마토그래피를 이용하여 타크로리무스와 아스코마이신의 혼합액으로부터 타크로리무스를 분리하는 방법에 관한 것으로, 상세하게는 흡착칼럼 내의 흡착수지(resin)에 대한 타크로리무스와 아스코마이신의 흡착률 각각을 계산하는 단계(단계 1)； 상기 단계 1에서 계산된 흡착률을 삼각형 이론에 적용하여 모사이동층(Simulated Movie bed, SMB) 크로마토그래피 공정의 공정조건을 계산하는 단계(단계 2)； 및 모사이동층 크로마토그래피에 타크로리무스와 아스코마이신이 혼합된 원료용액과, 용리액을 공급하고 상기 단계 2에서 계산된 공정조건을 적용하여 타크로리무스를 분리하는 단계(단계 3)；를 포함하는 모사이동층 크로마토그래피를 이용하여 타크로리무스와 아스코마이신의 혼합액으로부터 타크로리무스를 분리하는 방법을 제공한다. 본 발명에 따른 모사이동층 크로마토그래피를 이용하여 타크로리무스와 아스코마이신의 혼합액으로부터 타크로리무스를 분리하는 방법은 실제 상업화하여 사용할 수 있는 분리 방법으로써, 용리액으로 사용되는 용매의 사용량을 대폭 감소시킬 수 있고, 고순도의 타크로리무스를 고수율로 손쉽게 대량생산할 수 있는 효과가 있다.
