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建鲤原代肝细胞的分离培养方法
- 专利权人:
- 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心
- 发明人:
- 杜金梁,曹丽萍,殷国俊,贾睿,刘英娟,申玉金,赵才源
- 申请号：
- CN201410535197.9
- 公开号：
- CN104293731A
- 申请日:
- 2014.10.13
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 王月霞`唐循文
- 摘要：
- 本发明公开了建鲤原代肝细胞的分离培养方法，选取健康无伤的建鲤，从建鲤尾静脉处采血，完毕后对鱼体表面消毒，放入超净台内无菌采集建鲤肝脏；用含双抗的PBS溶液漂洗，加入胰酶消化液，消化处理温度为26~28℃，时间为15-20min；消化结束后加入培养基A终止消化，消化液经过200目过滤网进行过滤，收集滤液；分别用50g和30g各离心5min，然后用培养基B进行洗涤2次，去除上清液，得到沉淀即为提取的肝细胞，制成细胞悬液，铺板培养。本实验方法简单快捷，能很大程度上节约分离时间，本实验所用分离时间大约为40min，且获得的肝细胞生长状况良好，红细胞数量少，细胞存活率在95%左右。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
